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科普 | 带你走进牛血清白蛋白(BSA)的世界

发布时间:2022-11-10 22:27:47来源:仪器信息网

BSA(牛血清白蛋白)又称第五组分(需要注意的是,第五组分并不是BSA的一种组份,而是Edwin J. Cohn教授早期从血液中通过特定的分离技术得到5种组份,其中第五种就是白蛋白),英文名称为Bovine Serum Albumin,简称BSA。


1.如何选择合适的BSA
由于牛血清白蛋白(BSA)具有多种产品样式,可满足不同种的应用。目前网上的信息大多模棱两可,市场上有低脂肪酸级、低内毒素级、微生物级、试剂级、诊断分析级等多种BSA,因此如何选择合适的BSA产品是很重要的前提。

1.微生物级别
用于细胞培养、动物疫苗生产、传染致病菌培养基添加剂。

2.低内毒素级别
用于普通细胞培养、组织培养,作为干细胞培养的添加剂,作为无血清培养基载体以及作为营养添加剂。

3.低IgG级别
用于制备单克隆抗体,Southern和Northern印迹杂交实验,可作为EIA和RIA以及常规免疫实验的封闭液。利用亲和层析方法去除免疫球蛋白,确保在下游实验中不会与抗体结合。在免疫分析实验中不会被检测到。每个批次的牛血清白蛋白的IgG含量不高于0.05 mg/g。

4.低脂肪酸级别
用于体外胚胎移植,也可作为胚胎移植的饲养层营养物以及表面活性添加剂。可用于常规的细胞培养及组织培养。作为干细胞培养的添加剂,作为无血清培养基载体以及作为营养添加剂。利用亲和层析法去除脂肪酸以及其他小分子。每个批次的牛血清白蛋白的脂肪酸含量不高于0.05 mg/g。

5.标准级别
对蛋白酶敏感的免疫分析实验,如:RIA,EIA,荧光,化学发光分析;蛋白标准品,稀释液;蛋白,结合物和酶稳定剂;核酸杂交实验;细胞培养。

除了多种产品类型外,BSA的生产工艺更是被划分为3种:Cohn分馏法、热休克法和色谱层析法。


 

6.BSA的应用

牛血清白蛋白(BSA)在生化实验中有广泛的应用,例如:

1、在PCR体系中有助于Taq酶的稳定性及活性,可以提高PCR的效率。

2、ELISA中也常常用到,比如封闭液,样本稀释液,酶结合物稀释液都可以用BSA。

3、生化研究,遗传工程和药物研究。

4、血液中的白蛋白主要起维持渗透压作用、PH缓冲作用、载体作用和营养作用。

5、在动物细胞无血清培养中,添加白蛋白可起到生理和机械保护作用和载体作用。

除了以上提及的BSA应用方向外,当然还有其他实验中运用到,不妨来看看~
 

 应用1:疟原虫培养

体外连续培养的疟原虫是研究疟原虫的重要工具,然而用于维持疟原虫生长所必需的新鲜人血清却很难获得。研究人员发现,在恶性疟原虫培养基中加入含脂丰富的牛血清白蛋白可有效替代人血清,适用于红细胞内期疟原虫的体外连续培养[1]。或将人血清与含脂丰富的牛血清白蛋白按一定比例混合加入疟原虫培养基中,疟原虫可达到与全人血清培养相似的生长状态,这样就减少了对新鲜人血清的完全依赖[2]

结论:与其它品牌的高脂牛血清白蛋白相比,MP Biomedicals色谱层析法的牛血清白蛋白(除低脂肪酸级以外)的总脂含量大约是它们的总脂含量的2.5倍,因此广泛应用于疟原虫的体外培养[3]。高脂含量的牛血清白蛋白不仅有利于细胞培养,对于研究人员,也可减少胆固醇浓缩物或其它添加剂的使用,能显著增加细胞滴度。

 

 应用2:肝癌的研究

高浓度的游离脂肪酸(Free fatty Acids,FFAs)和肿瘤坏死因子(TNF-α)会改变细胞活动过程,引起脂毒性。研究人员发现,细胞内的脂质累积会降低游离饱和脂肪酸的脂毒性。因此,为了开发出有效治疗复杂及多种影响因素引起的疾病的治疗方法,寻找能调节多个细胞过程的基因,研究人员建立了一个模型,将人肝癌细胞(HepG2)置于高浓度FFA和TNF-α的生理环境中。整个实验分为对照组,BSA组,棕榈酸酯组,油酸酯组及亚油酸酯组,然后检测加入不同FFA的细胞中的甘油三酯(TG)累积,毒性和基因应答情况[4]

结论:研究结果发现一些参与调节脂质累积及细胞毒性的基因,这些参与多个细胞过程调控的基因有望成为对抗复杂疾病的理想候选作用靶点。

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