截止 2022 年 5 月 7 日至6月21日，全球已有38个国家报道确认感染猴痘病例，总计病例数达到2677例（数据源自Global.Health）。

本月16日，WHO免疫战略咨询专家组（SAGE）制定了有关天花和猴痘疫苗临时指南。鉴于猴痘疫情在全球非常规流行地区快速传播，专家们指出应对猴痘的流行病学、临床后果以及各种传播方式的作用展开更深入的研究。

Fig1.自2022年5月7日以来每个国家/地区的确诊病例数

上篇推文我们已经讲到过猴痘病毒(Monkeypox virus，MPXV)的来源，传播途径以及结构（见端午驱五毒|关于猴痘病毒，看完这篇就够了），其实痘病毒存在两种形式：成熟病毒粒子(mature virion，MV)和脂质膜(extracellular enveloped，EV)，EV有一层来自内质网膜的包膜，此包膜在与细胞接触后分解，露出外膜进而直接和细胞膜发生融合，随后进行下游的感染。而MV可以直接和细胞膜进行融合，至少有12种MV参与融合，同时可以通过巨胞饮内吞进入细胞，外膜与内吞体膜在内吞体里融合释放出内膜包绕的病毒核心。复制的场所是带孔洞的内膜中进行，之后孔洞闭合，病毒粒子进行下一步的成熟形成典型的痘病毒哑铃形态，标志MV正式形成。最终完成的病毒粒子可以有两种方式离开细胞：最主要的一种为细胞裂解，MV直接释放。另一种是利用细胞的分泌转运系统，通过高尔基体分泌至细胞外，这种方式会使得病毒额外获得一层被膜产生EV。

Fig2.痘病毒复制周期

普健生物联合法国Proteogenix顶级科学团队，双方通过对猴痘病毒(Monkeypox virus，MPXV)和痘苗病毒(vaccinia virus,VACV)的基因序列进行深入研究成功设计开发真核系统表达的猴痘病毒(Monkeypox virus，MPXV)系列核心蛋白A29L、A35R、B6R、M1R、E8L以及相关具有生物学活性的中和抗体产品，助力疫苗、药物、诊断试剂等不同方向的研究。

真核表达猴痘核心蛋白及相关中和抗体

A29L

A29L是细胞内成熟病毒（IMV）表面包膜蛋白（与牛痘病毒VACV,A27同源）。溶瘤痘苗病毒(VV)属于痘病毒科中一拥有192kb双螺旋DNA遗传物质的病毒,会在细胞质中繁殖出具有鞘膜的病毒,进而感染其他不同种的哺乳动物细胞及个体.VV中的A27L基因能表达出一14kDa大小的鞘膜蛋白,此蛋白能与细胞表面上的硫酸乙酰肝素（Heparan Sulfate）作用使病毒跟细胞结合并且可催化细胞融合。

A35R

A35R是细胞内包膜病毒粒子（IEV）和细胞外包膜病毒粒子（EEV）的包膜成分，与脊索痘病毒A33R同源。痘苗病毒中的A33R在病毒粒子在细胞间的传播中起着至关重要的作用，是疫苗开发的重要靶点，也有研究表明A35R是猴痘病毒(Monkeypox virus，MPXV)血清学检测的潜在靶点。

B6R

B6R是宿主范围蛋白，位于细胞外包膜病毒粒子（EEV）的膜上，与牛痘病毒补体控制蛋白B5同源，参与补体激活的负调节。研究表明B5依赖于与A33或A34的相互作用，以定位到细胞内包膜的位点，并能相互结合释放到细胞外病毒体的包膜中。B5对于有效生产感染性EV至关重要，A33，A34，B5三者复合物在ER退出以及三种糖蛋白正确定位到包裹的细胞内部位中起作用。

M1R

M1R与牛痘病毒L1蛋白同源，是一种在成熟IMV颗粒表面发现的跨膜蛋白。由L1R ORF编码，高度保守，参与病毒粒子组装，在病毒进入和成熟过程中发挥重要作用。L1是诱导低pH触发的细胞-细胞融合所必需的，且对牛痘病毒复制至关重要。

E8L

E8L是病毒入侵宿主细胞重要基因，在病毒入侵宿主完成复制的过程中作为MV的细胞表面结合蛋白与细胞表面的硫酸软骨素结合，以提供病毒粒子附着在靶细胞上。有研究表明利用siRNA技术能有效拮抗Monkeypox virus的A6R和E8L基因，由此构建siA6-a和si8 -d能破坏MPV复制。

H3L

H3L是一种324个AA长的糖基转移酶，位于病毒包膜上，在与宿主细胞的附着和随后的痘病毒进入中起关键作用。研究表明，天花疫苗诱导的抗体与H3蛋白结合，分化簇 (CD8)+ T细胞将H3L识别为抗原，表明其免疫学意义。

参考文献：

[1]Subunit recombinant vaccine protects against monkeypox. J Immunol. 2006 Aug 15;177(4):2552-64. doi: 10.4049/jimmunol.177.4.2552. PMID: 16888017.

[2]Outbreak of human monkeypox in Nigeria in 2017-18: a clinical and epidemiological report. Lancet Infect Dis. 2019 Aug;19(8):872-879. doi: 10.1016/S1473-3099(19)30294-4. Epub 2019 Jul 5. PMID: 31285143.

[3]A Nucleic Acid-Based Orthopoxvirus Vaccine Targeting the Vaccinia Virus L1, A27, B5, and A33 Proteins Protects Rabbits against Lethal Rabbitpox Virus Aerosol Challenge. J Virol. 2022 Feb 9;96(3):e0150421. doi: 10.1128/JVI.01504-21. Epub 2021 Dec 1. PMID: 34851148; PMCID: PMC8826804.

[4]Mapping and functional analysis of interaction sites within the cytoplasmic domains of the vaccinia virus A33R and A36R envelope proteins. J Virol. 2003 Apr;77(7):4113-26. doi: 10.1128/jvi.77.7.4113-4126.2003. PMID: 12634370; PMCID: PMC150634.

[5]Vaccinia virus induces cell fusion at acid pH and this activity is mediated by the N-terminus of the 14-kDa virus envelope protein. Virology. 1990 Sep;178(1):81-91. doi: 10.1016/0042-6822(90)90381-z. PMID: 2389560.

[6]Molecular Evidence of Human Monkeypox Virus Infection, Sierra Leone. Emerg Infect Dis. 2019 Jun;25(6):1220-1222. doi: 10.3201/eid2506.180296. Epub 2019 Jun 17. PMID: 30900976; PMCID: PMC6537715.

[7]Inhibition of monkeypox virus replication by RNA interference. Virol J. 2009 Nov 4;6:188. doi: 10.1186/1743-422X-6-188. PMID: 19889227; PMCID: PMC2777875.

[8]Rapid protection in a monkeypox model by a single injection of a replication-deficient vaccinia virus. Proc Natl Acad Sci U S A. 2008 Aug 5;105(31):10889-94. doi: 10.1073/pnas.0804985105. Epub 2008 Aug 4. PMID: 18678911; PMCID: PMC2495015.