为什么融合后细胞不长或者融合后克隆很少?

　　可以从这几个方面考虑：

　　1.免疫用动物品系不正确或者品系不纯。免疫用动物一般应该与骨髓瘤来源动物是相同品系，例如使用SP2/0骨髓瘤细胞时应该选用Balb/C 小鼠，同时必须使用品系纯正的小鼠。

　　2.培养基中加入过高浓度的HAT，或者仅A 的浓度过高或HT 的浓度过低，建议用纯的骨髓瘤和已有的杂交瘤作HAT 浓度筛选。

　　3.培养基不正确或血清浓度不正确或使用了劣质血清。

　　4.未正确制备饲养层细胞。

　　5.接种杂交瘤细胞的培养板过多。一般在5-20块96孔板为宜。

　　6.融合后，未及时转移或稀释细胞。有人在做融合后喜欢把融合的细胞先放在培养瓶中培养，然后再滴到96孔板上。如果在培养瓶中培养的时间过长，也可能出现克隆率少的情况。

　　7.细胞被污染。在显微镜下仔细观察是否有明显的微生物污染。即使看不到有明显的微生物，也应该考虑是否有支原体污染，条件允许的可以做支原体检测。

　　8.细胞培养条件不正确，确保细胞培养在恒定的37度恒温恒湿的环境，同时保证CO2浓度在4-5%左右。